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杨汝春 朱晓玲 张华琴 李卫冬
（杭州市中医院，浙江杭州市体育场路453 号，310007 ）
摘要 目的：观察白藜芦醇（Resveratrol）对TGF-β1 刺激的小鼠足细胞增殖、氧化损伤、细胞表型转化等
的影响，初步探索白藜芦醇对足细胞损害的干预作用及机制，为白藜芦醇在肾脏病防治领域 的应用提供
科学依据。方法：1）足细胞成熟分化：体外培养小鼠肾小球足细胞，在33℃和含有γ-IFN 的培养基中让
细胞增殖传代；然后，换成不含γ-IFN 的RPMI1640 培养基37℃分化成熟。2）白藜芦醇干预浓度的筛选：
通过MTT 试验、乳酸脱氢酶（LDH）释放试验测定白藜芦醇对足细胞增殖的影响及其细胞毒性。3）分组
及细胞处理：将分化成熟的足细胞分为正常组、模型组以及不同干预组，模型组用TGF-β1 刺激，而干预
组则在分别加入2μm、5μm、10μm 白藜芦醇以及20ng/mL 肝细胞生长因子（HGF）干预30min 后再加入
TGF-β1 刺激。4）足细胞各种分子的蛋白表达检测：分别采用免疫荧光技术、免疫细胞化学、流式细胞术、
Western-blotting 技术等检测足细胞裂空隔膜分子、连接蛋白以及EMT 相关分子的蛋白表达。5）足细胞各
种分子的基因表达检测：提取细胞总RNA，进行逆转录后采用SYBR 染料法进行实时荧光定量PCR 实验检测
各类细胞分子基因表达。6)单层足细胞蛋白滤过试验：建立双层共培养系统，检测下层牛血清白蛋白透过单层足细胞
进入上层小室的蛋白含量。结果：1）TGF-β1 刺激可明显降低ZO-1、P-cadherin、E-cadherin 等分子的蛋白表
达。2）白藜芦醇可明显拮抗TGF-β1 对P-cadherin 蛋白表达的下调作用，显著增加P-cadherin 蛋白表达水
平，而对ZO-1 蛋白表达、基因表达以及P-cadherin 基因表达等无显著影响。3）10μm 白藜芦醇3 可明显
增高Nephrin 和Podocin 基因表达。4）白藜芦醇可显著逆转TGF-β1 诱导的足细胞上皮细胞标志蛋白
E-cadherin 的表达下降，对α-***A 的蛋白表达有一定的抑制作用，但对Fn、Snail 等基因表达无显著影响。
5）白藜芦醇可显著降低单层足细胞对蛋白的滤过。结论：1）白藜芦醇和HGF 均可显著改善足细胞裂孔
隔膜蛋白表达异常，维持足细胞上皮细胞表型，抑制足细胞向间充质细胞转化。HGF 与白藜芦醇作用为带
你不同。2）白藜芦醇可显著降低白蛋白透过单层足细胞的滤过量，较好地维持足细胞滤过屏障的完整性。
Experimental Study on Resveratrol inhibiting podocytes dedifferentiationand ultrafiltration dysfunction
Yang ruchun Zhu Xiaoling Zhang Huaqin LI Weidong
Abstract To explore the effect of TGF-β1 on cell proliferation, oxidative damage, cell phenotype
dedifferentiation and so on on podocytes. The essay is trying to study the role of Resveratrol on podiocytes
damage induced by TGF-β1, and provide scientific basis for the application Resveratrol in the Field of Kidney
disease prevention.
Key words Podocyte；phenotype；Cytoskeleton；Transforming growth factor-beta; Resveratrol
第九届世界中医药大会
The 9th World Congress of Chinese Medicine
•27 4•
实 验 研 究
Experimental study
（杭州市中医院，浙江杭州市体育场路453 号，310007 ）
摘要 目的：观察白藜芦醇（Resveratrol）对TGF-β1 刺激的小鼠足细胞增殖、氧化损伤、细胞表型转化等
的影响，初步探索白藜芦醇对足细胞损害的干预作用及机制，为白藜芦醇在肾脏病防治领域 的应用提供
科学依据。方法：1）足细胞成熟分化：体外培养小鼠肾小球足细胞，在33℃和含有γ-IFN 的培养基中让
细胞增殖传代；然后，换成不含γ-IFN 的RPMI1640 培养基37℃分化成熟。2）白藜芦醇干预浓度的筛选：
通过MTT 试验、乳酸脱氢酶（LDH）释放试验测定白藜芦醇对足细胞增殖的影响及其细胞毒性。3）分组
及细胞处理：将分化成熟的足细胞分为正常组、模型组以及不同干预组，模型组用TGF-β1 刺激，而干预
组则在分别加入2μm、5μm、10μm 白藜芦醇以及20ng/mL 肝细胞生长因子（HGF）干预30min 后再加入
TGF-β1 刺激。4）足细胞各种分子的蛋白表达检测：分别采用免疫荧光技术、免疫细胞化学、流式细胞术、
Western-blotting 技术等检测足细胞裂空隔膜分子、连接蛋白以及EMT 相关分子的蛋白表达。5）足细胞各
种分子的基因表达检测：提取细胞总RNA，进行逆转录后采用SYBR 染料法进行实时荧光定量PCR 实验检测
各类细胞分子基因表达。6)单层足细胞蛋白滤过试验：建立双层共培养系统，检测下层牛血清白蛋白透过单层足细胞
进入上层小室的蛋白含量。结果：1）TGF-β1 刺激可明显降低ZO-1、P-cadherin、E-cadherin 等分子的蛋白表
达。2）白藜芦醇可明显拮抗TGF-β1 对P-cadherin 蛋白表达的下调作用，显著增加P-cadherin 蛋白表达水
平，而对ZO-1 蛋白表达、基因表达以及P-cadherin 基因表达等无显著影响。3）10μm 白藜芦醇3 可明显
增高Nephrin 和Podocin 基因表达。4）白藜芦醇可显著逆转TGF-β1 诱导的足细胞上皮细胞标志蛋白
E-cadherin 的表达下降，对α-***A 的蛋白表达有一定的抑制作用，但对Fn、Snail 等基因表达无显著影响。
5）白藜芦醇可显著降低单层足细胞对蛋白的滤过。结论：1）白藜芦醇和HGF 均可显著改善足细胞裂孔
隔膜蛋白表达异常，维持足细胞上皮细胞表型，抑制足细胞向间充质细胞转化。HGF 与白藜芦醇作用为带
你不同。2）白藜芦醇可显著降低白蛋白透过单层足细胞的滤过量，较好地维持足细胞滤过屏障的完整性。
Experimental Study on Resveratrol inhibiting podocytes dedifferentiationand ultrafiltration dysfunction
Yang ruchun Zhu Xiaoling Zhang Huaqin LI Weidong
Abstract To explore the effect of TGF-β1 on cell proliferation, oxidative damage, cell phenotype
dedifferentiation and so on on podocytes. The essay is trying to study the role of Resveratrol on podiocytes
damage induced by TGF-β1, and provide scientific basis for the application Resveratrol in the Field of Kidney
disease prevention.
Key words Podocyte；phenotype；Cytoskeleton；Transforming growth factor-beta; Resveratrol
第九届世界中医药大会
The 9th World Congress of Chinese Medicine
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实 验 研 究
Experimental study
