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[size=24]阿霉素肾病大鼠肾组织中血小板源性生长因子BB的表达及桃红四物汤干预的实验研究[/size]

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周启鑫

周启鑫
Admin

陈洪宇 陈理境 汤绚丽
(杭州市中医院,浙江杭州市体育场路453 号,310007 )
摘要 通过观察血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)在阿霉素肾病(AIN)大鼠肾组织的表达及经典活血
化瘀中药组方桃红四物汤对其表达的影响,探讨活血化瘀中药桃花四物汤对在阿霉素肾病(AIN)大鼠肾
小管间质保护作用的机理,为临床早期防治肾小管间质纤维化提供实验依据。
关键词 阿霉素肾病;血小板源性生长因子BB;桃红四物汤;实验研究
Experimental Study on Effects of Taohongsiwu Decotion on the Expression of PDGF-BB in nephridial
tissue of Adriamycin Nephropathy Rats
Chen Hongyu Chen Lijing Tang Xuanli
Abstract The aim of this study is to investigate mechanism of action of Platelet derived growth factor- BB
(PDGF-BB) in minimal lesion nephrotic syndrome and effects of Taohongsiwu decoction on the expressions of
PDGF-BB mRNA and protein in renal tissue of adriamycin-induced nephropathic rats.
Keywords Promoting blood circulation and removing blood stasis of traditional Chinese;adriamycin-induced
nephropathy(AIN);(platelet-derived growth factor, PDGF )-BB
1.材料与方法
SPF 级雄性SD 大鼠36 只,体重250 士20g,随机分为3 组。正常对照组12 只、模型对照组12 只、
桃红四物汤组(简称中药组)12 只。除正常组外,其余各组均采用阿霉素(ADR)6.5mg/kg 一次性尾静脉注
射,建立阿霉素肾病模型,正常对照组予等量生理盐水自尾静脉注射。造模当天开始治疗,中药组每日两
次经胃灌服中药汤剂治疗,连续治疗8 周。观察实验大鼠的一般情况。造模后第1、2、4、8 周留取尿标
本,于第4、8 周留取血检测谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)水平;在实
验结束时宰杀大鼠,取左肾用免疫组化测定大鼠肾组织中PDGF-BB 蛋白的表达和RT-PCR 半定量法测大
鼠肾组织中PDGF-BBmRNA 表达;取肾组织以光镜HE 染色检测肾小管病理学改变。
2.研究结果
结果显示阿霉素肾病大鼠4 周左右尿蛋白排泄达到高峰(表1);与模型组相比较,虽然无显著统计学
差异,但中药组显现能降低AIN 大鼠的24 小时尿蛋白量(表1)、以及保护肾功能趋势(表2);模型对照
组在实验结束后免疫组化及RT-PCR 观察PDGF-BB 蛋白和mRNA 表达情况与正常对照组比较明显上调
(P<0.05)(表3、4);中药治疗组与模型对照组比较,能显著下调PDGF-BB(P<0.05)(表3、4)。
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Clinical research
表1、造模后24h 尿蛋白定量
组别 鼠

造模后1周
(mg/24h)
造模后2周
(mg/24h)
造模后4周
(mg/24h)
造模后8周
(mg/24h)
正常组 12 13.82±5.36 28.48±2.76 37.8±6.34 43.64±7.05▲
模型组 12 86.61±15.8 592.27±73.52△ 789.94±81.26△ 916.41±129.10△
中药组 12 68.63±16.80 589.26±62.01△ 763±71.29△ 685.97±67.26△
注:与正常组比较△P <0.05,与模型组比较▲P <0.05。
表2、实验4 周末与8 周末时各组血清肌酐与尿素值比较
组别


实验4周末
Scr(μmol/L) Bun(mmol/L)
实验8周末(μmol/L)
Scr(μmol/L) Bun(mmol/L)
正常组 6 29.5±1.32 5.22±0.88 58.14±8.15 5.72±0.59
模型组 6 36.33±5.24 9.24±1.79△ 102.33±8.29△ 10.3±1.21△
中药组 6 36.83±3.55 8.48±1.36△ 91.33±4.08△ 10.3±0.31△
注:与正常组比较△P <0.05。
表3、免疫组化检测实验4 周末、8 周末时各组PDGF-BB 在肾组织表达阳性指数比较
组别 鼠数 造模后4周 造模后8周
正常组 6 44.97±5.38▲ 64.79±4.11▲
模型组 6 7104.47±535.52△ 7893.12±553.46△
活血化瘀组 6 3828.51±730.27△▲ 4238.83±690.89△▲
注:与正常组比较△P <0.05,与模型组比较▲P <0.05。
表4、RT-PCR 法测实验4 周末、8 周末时PDGF-BB mRNA 在各组肾组织中的表达
组别 鼠数 造模后4周 造模后8周
正常组 6 9.15±0.45▲ 9.10±1.18▲
模型组 6 29.75±1.07△ 28.84±1.45△
活血化瘀组 6 14.23±0.35△▲ 13.52±0.71△▲
注:与正常组比较△P <0.05,与模型组比较▲P <0.05。
3.结论与分析
阿霉素肾病大鼠肾组织尤其肾小管上皮细胞PDGF-BB 蛋白和mRNA 表达增强,与肾病的进展一致;
桃红四物汤对阿霉素肾病大鼠有减轻蛋白尿,保护肾功能;桃红四物汤还可以明显抑制PDGF-BB 蛋白和
mRNA 在肾组织中的表达,提示对阿霉素肾病大鼠肾小管间质纤维化具有早期防治作用。
建中益胃汤配合针灸治疗慢性萎缩性
胃炎的临床观察
吴本豪
(澳大利亚 悉尼)
摘要 目的:观察建中益胃汤联合针灸治疗慢性萎缩性胃炎的临床疗效。方法:将筛选的154 例慢性萎缩
性胃炎随机分为观察组与对照组进行临床观察。观察组采用建中益胃汤配合针灸治疗;对照组给予摩罗丹
口服,每次9g,每日3 次;两组均以两个月为一疗程,连用两个疗程。观察两组的临床症状及病理、胃镜
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征象等疗效变化。结果:经统计学分析:治疗组显效率及总有效率显著高于对照组(P<0.01 和P<0.05);
内镜治疗组显效率及总有效率显著高于对照组(P<0.01);病理显效率及总有效率均显著高于对照组(P
<0.05)。结论:建中益胃汤联合针灸疗法应用治疗慢性萎缩性胃炎比口服摩罗丹疗效更满意。
关键词 慢性萎缩性胃炎/针灸疗法;建中益胃汤;临床观察
A Clinical Observation of ChronicAtrophicGastritis By Using Jianzhongyiwei soup combined with
AcupunctureTherapy
Ben Hao Wu
Abstract Objective: To observe the clinical curative effect of chronic atrophic gastritis by using
Jianzhongyiwei soup combined with Acupuncture therapy. Methods: 154 patients of chronic atrophic gastritis
were randomly divided into observation group and control group. Jianzhongyiwei soup combined with
Acupuncture therapy was used on observation group; Moluodan was used on control group, patients of control
group take Moluodan orally 9g/1time, 3times/1day. Two months are one course of treatment, for a period of two
consecutive sessions. clinical symptom , pathology and gastroscope signs of two groups are observed. Results:
The excellence rate and the total effective rate of observation group is significantly higher than that in control
group using statistical analysis (P < 0.01 and P < 0.05), The excellence rate and the total effective rate of
therapeutic endoscopy group is significantly higher than that in control group using statistical analysis (P < 0.01),
The excellence rate and the total effective rate of pathology group is significantly higher than that in control group
using statistical analysis (P < 0.05).Conclusion: Jianzhongyiwei soup combined with Acupuncture therapy is
more satisfactory than oral application of Moluodan.
Keywords chronic atrophic gastritis, Acupuncture therapy, Jianzhongyiwei soup , Clinical observation
慢性萎缩性胃炎(CAG)是消化系统的常见病和多发病,而且发生恶变的机率比较高,1978 年世界卫
生组织将慢性萎缩性胃炎定为胃癌癌前状态,尤其是伴有胃黏膜上皮肠腺化生和胃黏膜上皮异型增生者癌
变的可能性更大,被称作胃癌前病变而引起医学界的高度重视。目前尚无特殊治疗方法[1]。因此临床对慢
性萎缩性胃炎进行早期有效的治疗以防癌变已成为目前研究重点。笔者自2002 年7 月至2010 年7 月,采
用自拟建中益胃汤配合针灸治疗慢性萎缩性胃炎,取得了良好的疗效,现总结如下。
1 一般资料
所选病例均符合《慢性胃炎中西医结合诊断、辨证和疗效标准》(试行方案)[2]中医辨证为肝胃不和、
脾胃虚弱、脾胃湿热、胃阴不足及胃络瘀血型。所选病历为胃镜已经确诊为慢性萎缩性胃炎者154 例。按
随机对照的原则分为治疗组78 例,其中男32 例,女46 例,年龄29~82 岁,平均(53.8±10.7)岁,病程
2~26 年,平均(11.0±6.0)年,伴肠化生50 例,异型增生23 例。对照组76 例,其中男37 例,女39 例,
年龄31~77 岁,平均(54.3±10.5)岁,病程2~25 年,平均(10.6±5.6)年,伴肠化生49 例,异型增生
18 例。中医主证、舌脉与治疗组相同。两组患者治疗前性别、年龄、病情、病程、中医分型等方面经统计
学分析,差异均无显著性意义(P>0.05),具有可比性。
2 治疗方法
两组患者在治疗期间停服其它的药物,并忌生冷、辛辣、烟酒、甜食等。治疗组给予自拟建中益胃汤
和针灸治疗。1)药物基本方:山药30g,天花粉30g,白芍20g,枸杞子15g,炒谷芽12g,炒麦芽12g,炒
鸡内金9g,半夏6g,香附12g,元胡15g,郁金9g,半枝莲12g,黄连6g,丹参10g,乌梅6g,甘草10g。
辨证加减:脾胃虚弱便溏者去黄连、半枝莲,加炒白术15g,薏苡仁30g,茯苓12g;瘀血阻络者改白芍为
赤芍,加红花6g、地龙9g;胃阴不足者去香附、郁金、半夏,加沙参、麦冬、生地黄各12g;脾胃湿热者
去黄芪、天花粉、半夏,加苍术10g、茯苓12g、藿香12g;肝胃不和者加柴胡10g、砂仁9g、枳壳9g;
胃黏膜病理示肠腺化生加莪术10g、白花蛇舌草30g、半边莲加至30g。对照组给予摩罗丹(中国邯郸制药
有限公司)口服,每次9g,每日3 次;两组均以两个月为1 个疗程,连服2 个疗程。2)针灸治疗:主穴
取足三里、中脘、内关、天枢。寒甚者可灸神阙,热痛可加刺支沟、厉兑;气虚加刺脾俞、胃俞、气海;
气滞、血瘀均加刺期门、行间。治疗组同时采用针灸常规治疗,脾俞及胃俞向脊柱斜刺0.8 寸。虚证给
予补法,其它诸证均施平补平泻法,留针20min。每日1 次,连续7d;间隔两天后可继续下一疗程。
3 观察指标
3.1 临床症状 对治疗前及疗程结束后患者胃痛、纳差、痞满、乏力、嗳气、口苦嘈杂、便溏等临床
表现进行对比分析观察疗效。
3.2 内镜直观征象[3-4] 观察用药前后胃黏膜萎缩(颗粒不平、皱襞萎缩、血管透见、灰白色肠上皮化
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生结节等情况)的变化。
3.3 病理诊断 根据2000 年5 月中国慢性胃炎研讨会共识意见制定的标准[3],对萎缩、肠化生、异型
增生变化进行分析判定治疗效果。
4 疗效判定标准
4.1 症状疗效 显效:临床症状消失或减轻2 级以上(含2 级),有效:临床症状减轻1 级,无效:临
床症状减轻不及1 级或加重。
4.2 内镜疗效 显效:内镜直观萎缩征象消失或减轻2 级以上(含2 级),有效:内镜直观萎缩征象减
轻1 级,无效:内镜直观萎缩征象减轻不及1 级或加重。
4.3 病理疗效 显效:病理检查腺体萎缩、肠化生及异型增生消失或减轻2 级以上(含2 级),有效:
萎缩、肠化生及异型增生减轻1 级,无效:萎缩、肠化生及异型增生减轻不及1 级或加重。
5 统计分析
采用SPSS10.0 统计软件分析,统计学处理采用t 检验和χ2 检验。
6 结果
6.1 疗效结果
6.1.1 症状疗效 治疗组显效55 例,有效16 例,无效7 例,总有效率91.02%;对照组显效23 例,有
效35 例,无效18 例,总有效率76.32%;治疗组显效率及总有效率显著高于对照组(P<0.01 和P<0.05)。
详见表1。
表1 两组症状疗效比较
组别 例数 显效 有效 无效 总有效率
治疗组 78 55 16 7 91.02
对照组 76 23 35 18 76.32
6.1.2 内镜疗效 治疗组显效39 例(50.0%),有效17 例(21.8%),无效22 例(28.2%),总有效率71.79%;
对照组显效18 例(23.68%),有效21 例(27.63%),无效37 例(48.68%),总有效率49.4%;治疗组显效
率及总有效率显著高于对照组(P<0.01)。详见表2。
表2 两组内镜疗效比较
6.1.3 病理疗效 治疗组萎缩显效43 例(55.12%),有效8 例(10.26%),无效27 例(34.62%),总有
效率65.38%;肠化生显效21 例(42.0%),有效11 例(22.0%),无效18 例(36.0%),总有效率64%;异
型增生显效9 例(39.13%),有效5 例(21.4%),无效9 例(39.13%),总有效率60.87%; 对照组萎缩显
效26 例(34.21%),有效9 例(11.84%),无效41 例(53.94%),总有效率46.05%;肠化生显效12 例(24.45%),
有效10 例(20.41%),无效27 例(55.10%),总有效率44.9%;异型增生显效2 例(11.11%),有效3 例
(16.67%),无效13 例(72.22%),总有效率27.8%;两组比较,治疗组萎缩、肠化生、异型增生的显效
率及总有效率均显著高于对照组(P<0.05)。
表3 两组病理疗效比较
治疗组 对照组
组别 例数 显效 有效 无效 总有效率例数 显效 有效 无效 总有效率
萎缩 78 43 8 27 65.4 76 26 9 41 46.1
肠化生 50 21 11 18 64 49 12 10 27 44.9
异型增生 23 9 5 9 60.9 18 2 3 13 27.8
7 讨论
慢性萎缩性胃炎是由各种病因引起的胃粘膜发生萎缩性改变的慢性胃炎,常伴有肠上皮化生,幽门螺
旋杆菌感染是其主要致病病因。临床上主要表现为胃脘部痞满、隐隐作痛、嗳气不舒等。中医将其归属于
“痞症”“胃脘痛”的范畴。病位在胃,病机根本为脾胃虚弱,属本虚标实之证。就脏腑而言,脾为后天之本,
与胃相表里,脾主升清、运化,胃主降浊、受纳,若脾胃虚弱,运化及升降功能失常,肝气易乘虚而犯之,
加之饮食不节,损伤脾胃,运化功能失职,酿生湿热痰浊,热久易损伤胃阴,所以本病病机当属本虚标实,
本虚指脾胃虚弱,胃阴不足,标实指湿热、痰浊、瘀血内停为主。根据病位及病性,治宜健运脾胃、滋养
组别 例数 显效 有效 无效 总有效率
治疗组 78 39 17 22 71.79
对照组 76 18 21 37 48.68
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胃阴、疏肝理气、化痰通络、清利湿热为主。方中山药、黄芪健脾益气,其中山药既能补气,又能养阴,
补而不滞,养而不腻;炒鸡内金、炒谷芽、焦山楂健脾益胃、消食导滞,白芍、乌梅、甘草酸甘化阴,缓
急止痛,元胡、香附、郁金疏肝解郁、理气止痛,郁金、元胡又可配合丹参活血化瘀,半夏理气化痰、和
胃降逆;天花粉既能清胸胃之烦热,又善于滋生阴液,入血分,消瘀血;黄连、半枝莲清热解毒,诸药全
用滋阴而不碍胃,理气而不伤阴,清湿热而不败胃,辛开苦降安定中州,调木扶土,扶正祛邪,使虚得补,
实得泻,达到药到病除之功效。现代医学认为慢性萎缩性胃炎与饮食、精神状态、各种社会因素、幽门螺
杆菌感染等多种因素有关。现代药理实验研究方中山药、黄芪等益气药可增加单核系统的吞噬功能,增加
病原微生物诱生干扰素的能力,增加机体免疫力[5];白芍、丹参、黄连、半枝莲、白花蛇舌草对幽门螺旋
杆菌均有直接的杀灭作用,而幽门螺旋杆菌的清除,使胃黏膜炎症充血、水肿、糜烂等消失,细胞增殖活
性下降,促进慢性萎缩性胃炎的恢复,丹参能改善萎缩性胃炎的黏膜血液供应,增加黏膜营养,使腺体再
生,现代实验研究、使用补气养阴解毒法对慢性萎缩性胃炎不仅能预防和逆转胃黏膜萎缩,而且能降低慢
性萎缩性胃炎大鼠血浆中SS的过度表达,其作用机理可能是通过调节SS和GH,促进胃黏膜血流量,增加
胃肠蠕动,增加胃酸分泌,从而预防胃黏膜萎缩,修复胃黏膜,阻断和逆转其癌前病变[6]。在临床上针灸
疗法也是治疗胃脘部病变的重要方法之一,《灵枢·九针十二原》日:“夫善用针者,取其疾也,犹拔刺也,
犹雪污也。犹解结也,犹决闭也。”针刺疗法重在舒通经络,活血开结。根据其病变所在经脉选穴进行针
刺,既能畅通脉络,又能理气止痛。针灸取内关配足三里、中脘,疏通胃气以升清降浊,调节胃肠功能。
实验表明针刺内关,对胃酸分泌,肠的运动有调整作用。中脘为胃之募穴,针刺可使健康人胃蠕动增强;
足三里穴为“足阳明胃经”的要穴,具有调理脾胃、补中益气、通经活络、针灸刺激足三里穴,可使胃肠蠕
动有力而规律,并能提高多种消化酶的活力,增进食欲,帮助消化。天枢为机体升降清浊之枢纽。人的气
机上下沟通,升降沉浮,均过于天枢穴。天枢是大肠之募穴,是阳明脉气所发,主疏调肠腑、理气行
滞、消食,是腹部要穴。大量实验和临床验证,针刺或艾灸天枢穴对于改善肠腑功能,消除或减轻
肠道功能失常而导致的各种证候,具有显著的功效。胃俞为胃之背俞穴,和胃健脾,理中降逆;脾俞
为脾之背俞穴,健脾和胃,利湿升清;诸穴配合对机体的细胞免疫和体液免疫均有显著调节作用,并有较
好的止痛作用,同时可促进机体的修复能力,破坏细菌和病毒所处的环境和抑制细菌、病毒的活动。临床
中应用中药配合针灸治疗慢性萎缩性胃炎,针药并施,虚实兼顾,调理气机,直达病所,解除病痛,无副
作用,实为临床治疗慢性萎缩性胃炎首选方法。
参考文献
[1] 姒建敏,章宏,王开明,等.萎缩性胃炎表皮生长因子及其受体表达的临床意义探讨.中华消化杂志,1998,18(4):271-273.
[2] 周建中,陈泽民,危北海.慢性胃炎中西医结合诊断、辨证和疗效标准(试行方案).中西医结合杂志,1990,10(5):318-319.
[3] 全国慢性胃炎研讨会共识意见.中华消化杂志,2000,20(3):199-201.
[4] 慢性胃炎的内镜分型分级标准及治疗的试行意见.中华消化内镜杂志.2004,21(2):77-78.
[5] 吴和木,肖颖,倪如雄.中药治疗慢性萎缩性胃炎伴肠化生/异型增生.世界华人消化杂志,1999,7(1):7.
[6] 黄妙珍,陈芝芸,严茂祥,等.补气养阴解毒法对慢性萎缩性胃炎模型大鼠生长抑素和生长激素的影响.中医杂志,2003,44(11):857-859.

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