大宝国医论坛


Join the forum, it's quick and easy

大宝国医论坛
大宝国医论坛
Would you like to react to this message? Create an account in a few clicks or log in to continue.
大宝国医论坛

中医学习


您没有登录。 请登录注册

[size=24]痛风泰颗粒对痛风大鼠肿胀关节周径及5-HT 影响的实验研究[/size]

向下  留言 [第1页/共1页]

周启鑫

周启鑫
Admin

张剑勇 邱侠 钟力 黄华 谢静静 陈维
(深圳市中医院,广东深圳,518033)
摘要 目的:对痛风泰颗粒治疗大鼠急性痛风性关节炎的镇痛及抗炎作用进行实验研究。方法:将SD 大鼠
120 只随机分为6 组,即空白对照组(A 组)、模型对照组(B 组)、双氯芬酸组(C 组)、痛风泰低剂量组
(D 组)、痛风泰中剂量组(E 组)、痛风泰高剂量组(F 组),每组20 只,采用Coderre TJ 方法造模后,
分别予灌服生理盐水,双氯芬酸溶液及不同浓度的痛风泰溶液,观察其对关节周径的影响,并分别于治疗
第3、7 天后取关节滑膜进行组织匀浆,用ELISA 酶联免疫法,检测关节滑膜组织中细胞因子5-HT 的含
量变化。结果:1)双氯芬酸组、痛风泰中剂量组及痛风泰高剂量组在用药72h 后关节肿胀明显减轻,较
造模后比较,差异有统计学意义(P<0.01)。2)痛风大鼠关节滑膜中疼痛介质5-HT 的含量变化:治疗3
天后,与模型对照组比较,各治疗组5-HT 含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗7 天后,
与空白对照组比较,双氯芬酸、痛风泰中剂量及痛风泰高剂量组均未见明显差异,P>0.05。结论:痛风泰
颗粒能减轻MSUC 所致急性痛风性关节炎关节肿胀程度,能降低5-HT 浓度,减少疼痛介质的释放,较好
地发挥镇痛作用。
关键词 痛风;关节炎;痛风泰颗粒;5-HT
Influence of Tongfengtai granules on swelling joint dimension and 5-HT of Acute Gouty Arthritis of Rats
in Experimentation Research
Zhang jianyong Qiu xia Zhong li Huang hua Xie jingjing
Abstract Objective:To confirm the role of Tongfengtai granules in analgesic and anti-inflammatory effect of
treatment of experimental acute gouty arthritis of Rats.Methods:with a total of 120 rats were randomly divided
into 6 groups,namely blank control group (group A), model control group (group B), diclofenac group (C group),
第九届世界中医药大会
The 9th World Congress of Chinese Medicine
·231·
实 验 研 究
Experimental study
Tongfengtai low dose group (group D), Tongfengtai in dose group (E group), Tongfengtai high dose group (group
F),every group 20 rats,being adopted the classic model-*** way of McCarty D J, all rats were lavage
comparatively with physiological saline, diclofenac solution and different concentrations of tongfengtai
decoction,to observe the effect of joint diameter,respectively treatment for 3 or 7days,take joint synovial
organize slurry,With ELISA enzyme linked immune method to test joint synovial tissue cell factor 5 – HT content
changes. Results:1 st:After rats models of acute gouty arthritis in 72h,Diclofenac group, tongfengtai in dose
group and tongfengtai high dose group significantly reduce joint swelling, their difference was significant
(P<0.01). 2nd:5-HT: after treatment three days, compared with model control group, each treatment group 5-HT
content decrease, their difference was statistically significant (P < 0.05); After 7 days of treatment ,the blank
control group comparison, diclofenac, tongfengtai in dose and high dose group gout tiger there were no obvious
difference, P > 0.05.Conclusion:Tongfengtai granules can reduce the degree of ankle swelling of acute gouty
arthritis rats models established by MSU, reduce 5-HT concentration, reduce pain mediaum release, better control
analgesic action.
Key words Gouty;Arthritis; Tongfengtai granules; 5-HT
痛风是长期嘌呤代谢、血尿酸增改引起组织损伤的一组异质性疾病。随着现代人生活水平的提高,饮
食结构的改变,痛风患者日益增多。目前,治疗痛风的主要药物如别嘌呤醇、苯溴马隆、秋水仙碱等,均
有明显的副作用,许多患者不堪忍受,依从性差。笔者经验方痛风泰颗粒治疗急性痛风性关节炎,取得了
较显著的临床疗效,在控制痛风性关节炎急性发作,减轻受累关节红肿热痛症状等方面有独到的优势。本
实验从动物实验角度研究痛风泰颗粒对大鼠急性痛风性关节炎的镇痛及抗炎作用机制,观察治疗前面大鼠
肿胀关节周径的变化、检测关节滑膜中5-HT 含量变化,阐明痛风泰颗粒效应机理,为中药治疗痛风提供
实验依据。
1 实验材料
1.1 实验动物 实验选用普通健康SD 大鼠,雄性,体重(200 士20)g,120 只,由广东省实验动物中心
提供,许可证号:SCXK(粤)2008-0002。自由饮水、进食,光照8~10h/天,温度:22~24℃,适应性喂养
1 周后开始试验。
1.2 实验药品及造模药物 双氯芬酸钠:购于Temmler Werke GmbH,生产批号:91653。痛风泰颗粒:
由土茯苓45g、山慈菇10g、山茱萸6g、川牛膝10g、秦艽15g、粉萆薢30g、赤芍10g 等药物组成。由江
阴天江药业有限公司生产,产品批号(1012266)。
1.3 主要试剂 尿酸钠晶体:美国SIGMA-ALDRICH 公司,生产批号:310-143-1。5-HT、ELISA 试
剂盒,产品编号:2F052T,美国uscnlife 生产,均由深圳市中生生物技术有限公司进口分装。
1.4 主要仪器 DENLEY DRAGON Wellsean MK 3 酶标仪、Wellwash 4MK2 洗板机、TGL-168 离心机、
规格20-200ul 移液枪等。
2 实验方法
2.1 动物分组 将120 只大鼠随机分成空白对照组(A 组)、模型对照组(B 组)、双氯芬酸组(C 组)、
痛风泰低剂量组(D 组)、痛风泰中剂量组(E 组)、痛风泰高剂量组(F 组),每组20 只。
2.2 造模与治疗 造模方法:将100 只大鼠采用Coderre TJ 造模法向大鼠右踝关节注入MSU 溶液,另
空白对照组20 只大鼠注射等量生理盐水。大鼠腹腔注射10%水合氯醛麻醉(0.3mL/100g),用5 号注射针
在受试大鼠右踝关节外侧后方为穿刺点,针口斜面朝前上方与胫骨成45。角穿入踝关节腔,注入50μL 尿
酸钠溶液(浓度为20mg/mL)到关节腔,以关节囊对侧鼓起为注入目标,造成急性痛风性关节炎的病例模型。
造模成后随即分成5 组,每组20 只。
药物治疗:造模后第开始药物治疗。药物剂量按照《中药药理研究方法学》[1]试验动物与人用药量的
换算方法换算。参考徐叔云等[2]的方法,痛风泰低、中、高剂量用药量比例为1:2:4,给药计量分别如下。
空白对照组、模型对照组:生理盐水20mL/kg;痛风泰高剂量组:每只大鼠灌胃22.68g/kg;痛风泰中剂量
组:每只大鼠灌胃11.34g/kg;痛风泰低剂量组:每只大鼠灌胃5.67g/kg。双氯芬酸组:每只大鼠灌胃
67.5mg/kg,剂量均为4mL。每组给药均每日2 次,每次2mL,共7 天。
2.3 标本采集 以上各组在用药第2 天和第7 天每组各取10 只,大鼠断头处死,关节腔剖开,切取关
节滑膜,按比例加生理盐水稀释,放入组织匀浆机中进行匀浆,离心(4000r/min ,5min),取上清液,于
-70℃冰箱保存待检测5-HT 含量。
第九届世界中医药大会
The 9th World Congress of Chinese Medicine
·23 2·
实 验 研 究
Experimental study
2.4 观察指标及检测方法 1)测量大鼠踝关节周径:实验时,用记号笔在大鼠右后肢踝关节周围做一
标记,用软尺在造模前、造模后4h、12h、24h、48h 分别测定大鼠右后足测算关节周径。2)测定痛风大
鼠踝关节滑膜组织中5-HT 的含量:采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法成批检测,检测步骤、方法严格
按试剂盒说明书进行。
2.5 统计学方法 使用stata12.0 统计软件进行统计学处理,计量资料指标先进行正态分布检验,均用
( x  s )表示,组间及组内差异采用成组资料的 t 检验;计数资料均采用卡方检验。
3 结果
3.1 一般情况 各组大鼠给药前,皮毛光泽色白,精神佳,好动,饮食正常;造模后,前3 天各组大
鼠局部关节皮肤红肿,跛行,活动减少,摄食及饮水次数也明显减少;3 天后各组大鼠活动、摄食、饮水
基本恢复。
3.2 痛风大鼠关节周径 分别记录大鼠在造模前、造模后及用药后4h、24h 及48h 后的踝关节周径变
化,造模后与造模前比较,差异具有统计学意义(P<0.05),证实造模成功。双氯芬酸组、痛风泰中剂量
组及痛风泰高剂量组在用药72h 后关节肿胀明显减轻,较造模后比较,差异有统计学意义(P<0.01)。见
表1。
表 1 大鼠关节周径的影响( x  s ,mm)
组别 鼠数 造模前 造模后 用药时间
4h 24h 72h
※A 组 20 28.00±1.64 28.03±1.65 28.04±1.65 28.04±1.65 28.04±1.74
B 组 20 27.35±1.27 32.05±2.541) 34.05±1.35 33.45±1.85 32.65±1.25
C 组 20 26.50±2.20 32.45±2.561) 34.25±2.56 32.45±1.76 27.05±1.862)
D 组 20 27.30±1.85 30.54±3.051) 33.54±3.05 32.64±3.25 29.94±2.05
E 组 20 27.50±1.58 31.24±2.48 1) 34.24±2.42 32.24±2.43 27.85±2.362)
F 组 20 26.50±2.50 30.15±1.37 1) 33.15±1.37 31.55±1.49 27.05±2.062)
注:※A 组未注MSU 造模,观察期间仅用生理盐水灌胃,未予药物治疗。与造模前比,1)P<0.05;与造
模后比,2)P<0.01;
3.3 痛风大鼠关节滑膜中疼痛介质的变化 检测用药第3 天及第7 天时关节滑膜中5-HT 的含量。治
疗3 天后,与模型对照组比较,各治疗组5-HT 含量明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);经治疗7
天后,与模型对照组比较,低痛风泰组5-HT 无统计学意义(P>0.05),与空白对照组比较,双氯芬酸、
痛风泰中剂量及痛风泰高剂量组均无统计学意义,P>0.05。详见表2。
表2 痛风大鼠关节滑膜5-HT 含量 ( x  s ,ng/g)
组别 鼠数 第3 天 第7 天
※A 组 10 752.32±89.34 675.48±96.98
B 组 10 986.86±105.34 842.32±101.91
C 组 10 714.18±86.37 1)3) 626.34±113.461)3)
D 组 10 854.84±123.46 1) 754.45±112.982)
E 组 10 743.85±96.32 1)3) 658.43±101.381)3)
F 组 10 704.85±84.39 1)3) 605.34±79.561)3)
注:※A 组未注MSU 造模,观察期间仅用生理盐水灌胃,未予药物治疗。与模型对照组比, 1)P<0.05,
2)P>0.05 ;与空白对照组比,3)P>0.05.
4 讨论
痛风急性关节炎主要是由于尿酸盐刺激机体产生一系列的急性炎症反应,表现为患处红、肿、热、痛,
痛风发作时疼痛非常剧烈,陈氏[3]推测这种疼痛的原因为局部致痛物质产生过多,刺激局部感觉神经末梢。
在外周,5-HT 是一种单胺类神经递质,是引起关节疼痛的主要致痛因子,通过刺激局部感受神经末梢外
第九届世界中医药大会
The 9th World Congress of Chinese Medicine
·233·
实 验 研 究
Experimental study
周感受器产生很强的致痛效应。张氏[4]发现造模后受试关节周围软组织中5-HT 浓度明显升高,经痛风洗
剂治疗后,可明显降低大鼠周围软组织中5-HT 浓度,从而起到镇痛的作用。周氏[5]证明痹清胶囊通过降
低痛风性关节炎模型大鼠滑膜组织5-HT 的浓度,减少疼痛介质的释放,较好地发挥镇痛作用。
本实验针对急性痛风性关节炎的发病机制,采用Coderre 等[6]设计的痛风模型,探究痛风泰颗粒在治
疗痛风性关节炎中的抗炎、镇痛作用。本研究显示:痛风泰颗粒的高剂量组、中剂量组对MSU 所致大鼠
关节肿胀均有较强的抑制作用,与双氯芬酸组相当;可降低受累关节滑膜中的5-HT 含量,起到镇痛作用;
从而起到减轻疼痛症状的作用。
近年来,笔者在针对中医药如何防治痛风方面做了大量的临床和动物实验方面的研究工作,发现岭南
地域位于亚热带,终年气温较高,雨湿较盛。且人们喜食海鲜阴柔之品,常贪凉饮冷,至脾胃内伤,湿浊
内生。湿浊蕴久,内生湿热,与外之湿热气候相合,则易导致湿热内蕴。湿热蕴久则生瘀,致瘀血阻络,
痹阻关节而出现关节红肿热痛等症状。因此根据中医“急则治其标,缓则治其本”原则,针对痛风急性发作
给患者带来的痛苦,采取“清热利湿、解毒化浊、祛瘀止痛”的原则制定痛风泰颗粒药方,再结合现代药理
研究,开发出痛风泰颗粒对患者进行辨证治疗,取得了令人满意的临床疗效[7]。本研究证实痛风泰颗粒是
治疗急性痛风性关节炎的有效方剂,为扩大其临床运用提供了客观的实验依据。
参考文献
[1] 陈奇.中药药理研究方法学[M].北京:人民卫生出版社,1996,1103-1105.
[2] 徐叔云,卞如濂,陈修.药理实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2002:913-915.
[3] 陈文照,吴士良,姜宏,等. 防己黄芪乌苡汤对急性痛风外周神经递质的影响[J].中国医药学报,1997,12(4):25.
[4] 张史昭,黄蔚霞,李学铭,等.痛风洗剂对尿酸钠诱导大鼠痛风性关节炎的防治作用[J].中国中医药科技,2001,8(3):154-155.
[5] 周敏,李萌,韩玉生,等.痹清胶囊对痛风性关节炎大鼠关节滑膜组织中5-羟色胺、钾离子含量的影响[J].中国实验方剂学杂志,2008,14(12):
47-48.
[6] Coderre TJ,Wall PD Ankle joint arthritis in rats:Anahenative animal model of arthritis to that produce byFreud’s adjuvant[J].Pain,1987,28:379-393.
[7] 张剑勇,邱侠,刘题章,等.痛风泰颗粒剂治疗急性痛风性关节炎患者的临床研究[J].中外健康文摘,2010,7(30):308-310.

http://dabaoguoyi.5luntan.com

返回页首  留言 [第1页/共1页]

您在这个论坛的权限:
不能在这个论坛回复主题